泡菜污廢水處理-泡菜廢水處理-綠島污水淨化處理設備廠

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泡菜污廢水處理

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高(gāo)鹽廢水是指鹽度（以ＮａＣｌ計(jì)）至少(shǎo)為10％（質量分數(shù)）的廢水，主要包括含鹽工業廢水、含鹽生活污水和(hé)其他含鹽廢水。四川泡菜是具有(yǒu)地方特色的發酵蔬菜制品，泡制泡菜後的高(gāo)鹽廢水通(tōng)常鹽度達到5.0％左右，其中含有(yǒu)大(dà)量的嗜鹽菌。由于嗜鹽菌具有(yǒu)特殊的結構和(hé)理化性質，能抵抗高(gāo)鹽濃度環境脅迫，不易污染，可(kě)減少(shǎo)發酵工藝，降低(dī)成本，因此常用于發酵生産。嗜鹽菌種類繁多(duō)，它們的分類主要依據三個(gè)方面：表型特征、化學分類數(shù)據和(hé)分子生物學數(shù)據。

嗜鹽菌的分離和(hé)菌體的培養　

　　将冷凍保藏的高(gāo)鹽廢水置于培養箱中解凍活化，取0.1ｍＬ到ＥＰ管中，再加入0.9ｍＬ已滅菌的蒸餾水，用漩渦振蕩器(qì)混合均勻。從中取200μＬ均勻塗布于ＬＢ培養基（其中ＮａＣｌ濃度為１５％）上(shàng)，37℃倒置培養48ｈ。從長出的菌中挑選20株長勢較好的菌株轉接到新的LB培養基上(shàng)，并對每一株菌進行(xíng)編号。

再對每株菌進行(xíng)反複劃線，直到得(de)到單菌落。後将分離得(de)到的菌劃線于保藏管中保藏待用。配制液體ＬＢ培養基300ｍＬ，分别置于３個(gè)三角瓶中，選取３株長勢較好，差異較大(dà)的菌分别接種于３個(gè)三角瓶中，并作好标記，于37℃，200ｒ／ｍｉｎ搖床培養,17ｈ。

16ＳｒＤＮＡ序列及系統發育分析

基因組ＤＮＡ的提取和(hé)１６ＳｒＤＮＡ的擴增及序列分析參見Ｔｏｒｕ　Ｓｈｉｇｅｍａｔｓｕ等方法。引物采用細菌１６ＳｒＤＮＡ　ＰＣＲ擴增通(tōng) 用引物Ｅｕ２７Ｆ（５′ －ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡＧ－３′ ，１０ μ Ｍ）和(hé)原核微生物特異引物１４９０Ｒ（５′ －ＧＧＴＴＡＣＣＴＴＧＴ　ＴＡＣＧＡＣＴＴ－３′ ，１０ μ Ｍ）。ＰＣＲ擴增條件：９４℃ 變性１ｍｉｎ，５０℃ 退火(huǒ) １．５ｍｉｎ，７２℃ 延伸２ｍｉｎ，３０個(gè)循環。ＰＣＲ産物經ｐＧＥＭ－Ｔ載體Ｔ－Ａ克隆入Ｅ．ｃｏｌｉ　ＤＨ　５α ，挑選陽性菌落，提取重組質粒。将質粒送ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司進行(xíng)序列測定，并将測得(de)的序列去載體後提交到ＮＣＢＩ進行(xíng)比對，将所測序結果與數(shù)據庫中已知序列在ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據庫中比對，獲得(de)與實驗菌株相似的典型菌株１６ＳｒＤＮＡ序列，選取序列用Ｃｌｕｓｔａｌ　Ｘ和(hé)ＭＥＧＥ　４．０繪制系統發育樹(shù)，對所構建的系統發育樹(shù)評估。

三、結果

1.嗜鹽菌的分離結果

劃線分離後得(de)到的單菌落和(hé)終分離得(de)到的２０株單菌。由圖1，圖2可(kě)知，分離得(de)到的這２０株單菌株有(yǒu)一定的耐鹽性，能在含鹽量為１５％的ＬＢ培養基上(shàng)生長；嗜鹽菌菌落部分為白色，部分為黃色，扁平，表面光滑，濕潤，直徑在１～２ｍｍ左右。挑選出差别較大(dà)菌株分别命名為ＭＳ１、ＭＳ２、ＭＳ３。